分子生物試劑在生物科研試劑占比大接近51%,各類生物制品的研發(fā)及生產(chǎn)離不開對酶、抗原、抗體等共性的功能性蛋白進行定向改造與進化,功能性蛋白的下游應用領域非常廣泛。
用于細胞生物學中的常見分子生物試劑類別如下:
1.蛋白酶抑制劑
廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團結(jié)合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。在生物學實驗中,經(jīng)常需要破碎細胞提取蛋白質(zhì),這一過程同時可釋放出蛋白酶,這些蛋白酶需要迅速地被抑制以保持蛋白質(zhì)不被降解。在蛋白質(zhì)提取過程中,需要加入蛋白酶抑制劑以防止蛋白水解。常用的蛋白酶抑制劑包括PMSF、胃蛋白酶抑制劑、亮抑蛋白酶肽、胰蛋白酶抑制劑和蛋白酶抑制劑混合使用。各種蛋白酶對不同蛋白質(zhì)的敏感性各不相同,因此在試驗中需要調(diào)整各種蛋白酶的濃度。由于蛋白酶抑制劑在液體中的溶解度極低,尤其應注意在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑時應充分混勻以減少蛋白酶抑制劑的沉淀。
2.激酶調(diào)節(jié)劑
激酶調(diào)節(jié)劑一般指蛋白激酶調(diào)節(jié)劑,蛋白激酶,即蛋白質(zhì)磷酸化酶,是一類重要的催化蛋白質(zhì)磷酸化反應的酶。在信號轉(zhuǎn)導的過程中有兩個作用:一是通過磷酸化調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性;二是通過蛋白質(zhì)的逐級磷酸化,使信號逐級放大,從而引起細胞反應。蛋白激酶的種類比較多,大部分都是屬于重要的信號傳導分子,其中對生物學功能影響比較大的有蛋白激酶G、蛋白激酶C、蛋白激酶a、蛋白激酶b、MAPK等。
蛋白激酶活性異常是導致腫瘤發(fā)生、生長和轉(zhuǎn)移的重要原因之一。因此以蛋白激酶作為抗癌靶點,研發(fā)新型抗腫瘤藥物,已經(jīng)成為藥物研發(fā)領域中最重要的研究方向之一,蛋白激酶調(diào)節(jié)劑也成為頗具潛力的抗腫瘤候選藥物。
3.細胞周期調(diào)節(jié)劑
細胞周期是細胞生命活動的基本過程,它控制著細胞從靜止期轉(zhuǎn)向生長增殖期。細胞周期進程的實現(xiàn)有賴于各級調(diào)控因子對細胞周期精確而嚴密的調(diào)控,細胞周期蛋白依賴激酶和細胞周期蛋白是整個細胞周期調(diào)控機制中的核心分子。
細胞周期調(diào)控異常與細胞癌變密切相關,90%以上的腫瘤,尤其是膠質(zhì)瘤和軟組織肉瘤中激酶都有過度表達。